Benzonase Nuclease高活力全能核酸酶
——消灭核酸，拒绝污染
1. 前言
核酸污染是生物样本制备中常常遇到的问题。在蛋白纯化的过程中，如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白纯化的得率很低、蛋白检测的结果很差，那么您的样本可能遭受了核酸污染。
如何去除核酸？超声法和DNase/RNase酶法是常用的方法，但存在诸多缺陷（表1）。
表1 核酸去除，超声法与DNase/RNase酶法优缺点
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超声法 |
DNase/RNase酶法 |
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优点 |
利用剪切力可在一定程度上降解核酸 |
利用核酸内切酶活性，可在温和条件下，较好的消化核酸 |
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缺点 |
仅能打碎大片段核酸； 超声过程产热，易降解热敏感的成分； 机械操作随机性强，难评估核酸清除的有效性 |
在使用时需摸索两种酶的最佳使用条件，操作繁琐、可重复性差 |
为了高效、可重复性的去除核酸，建议您使用翊圣全能核酸酶（Benzonase Nuclease）。
2. 产品优势
Benzonase Nuclease，是一种来源于Serratia Marcescen的基因工程酶，以二聚体形式存在，包含2个完全相同的亚基，单个亚基的分子量约为30 kD，因其能降解所有形式的DNA和RNA（包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸），且不具有碱基识别特异性，所以又称全能核酸酶或广谱核酸酶。不仅可应用在科研研究中作为生物样本去除核酸干扰的首选酶制剂；还可应用于疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业，去除宿主残留核酸，提高制品生物功效。
图1 全能核酸酶结构图
全能核酸酶，作为一种酶，其最重要的指标是活力和纯度。翊圣生物选用进口优质原料，提供活力高于250 U/μL，比活高于1.0×106 U/mg蛋白，零内毒素污染，零蛋白酶污染，且每批次均经过严格质量控制和功能验证的全能核酸酶，可保证高效、可重复性的降解所有形式的核酸，非常有助于防止蛋白凝集、降低蛋白溶液粘度、提高蛋白得率、提高病毒纯化效率、改善蛋白电泳分辨率以及提高高通量测序质量等。
« 降解所有形式的DNA和RNA
« 无蛋白酶、内毒素污染
« 广泛的试剂兼容性
« 超高的核酸消化活力
« 每批次产品严格质保与功能验证
« 可有效应用于：
蛋白、病毒及其他生物样本的纯化
降低由核酸引起的样本粘度
电泳、色谱、NGS、免疫学实验样本的制备
3. 产品性质
全能核酸酶消化核酸的作用原理为水解核苷酸间的磷酸二酯键，产生含3-8个碱基的5'-单磷酸寡核苷酸。在非常广泛的条件下，全能核酸酶都能保持很高的稳定性和消化活力，这使其能够与多种细胞裂解液，如RIPA，或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。表1中列举了全能核酸酶可发挥核酸消化作用的部分条件参数。除此之外，全能核酸酶还可耐受6 M Urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，0.4% Sodium deoxycholate。
表2 全能核酸酶作用条件
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条件参数 |
最适条件 |
可作用条件 |
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Mg2+ |
1-2 mM |
1-10 mM |
|
pH |
8.0-9.2 |
6.0-10.0 |
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Temp |
37℃ |
0-42℃ |
|
DTT |
0-100 mM |
>100 mM |
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β-Mercaptoethanol |
0-100 mM |
>100 mM |
|
Monovalent cation（Na+，K+） |
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