b-AP15

MCE 国际站：b-AP15

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-13989

CAS：1009817-63-3

Synonyms：NSC 687852

纯度：98.57%

存储条件：Powder -20°C 3 years 4°C 2 years *该产品在溶液状态不稳定，建议您现用现配，即刻使用。

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产品活性：b-AP15 特异性抑制去泛素化酶 (deubiquitinating) UCHL5 和 Usp14活性。

体外：用指定浓度的 b-AP15 处理纯化的 19S 蛋白酶体 (5 nM)，并通过检测 Ub-AMC 裂解来确定 DUB 活性。IC50 值 (2.1±0.411 μM) 是使用非线性回归分析从 Graph Pad Prism 中的对数浓度曲线确定的。b-AP15 作为一类以前未确定的蛋白酶体抑制剂，可消除 19S 调节颗粒的去泛素化活性。b-AP15 抑制两种 19S 调节颗粒相关去泛素化酶、泛素 C 末端水解酶 5 (UCHL5) 和泛素特异性肽酶 14 (USP14) 的活性，导致聚泛素的积累。b-AP15 诱导的肿瘤细胞凋亡对 TP53 状态和凋亡抑制剂 BCL2 的过表达不敏感[1]。使用 Ub-AMC 作为底物确定 b-AP15 抑制蛋白酶体去泛素化酶活性的能力。观察到 IC50 为 16.8±2.8 μM[2]。b-AP15 是一种特异性 USP14 和 UCHL5 抑制剂，可阻断 MM 细胞的生长并诱导其凋亡[3]。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

体内：b-AP15 (2.5 mg/kg) 在同源小鼠模型中抑制肿瘤生长，给药频率较低。我们使用 2-d-on、2-d-off 方案对患有 Lewis 肺癌 (LLC) 的 C57BL/6J 小鼠和使用 1-d-上，3-d 关闭时间表。b-AP15 在两种模型中均显著抑制肿瘤生长，C57BL/6J 小鼠的 T/C=0.16 (P≤0.01) 和 BALB/c 小鼠的 T/C=0.25 (P≤0.001)。在用 b-AP15 处理的 4T1 乳腺癌小鼠组中也观察到肺转移数量减少[1]。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

动物实验：对于鳞状细胞癌模型，我们将 1×106 FaDu 细胞皮下注射到雌性 SCID 小鼠的右后侧。肿瘤生长通过公式长×宽2×0.44 来测量。当肿瘤长到大约 200 mm3 时（定义为第 0 天），小鼠被随机分配接受载体（n=10）或 b-AP15（n=15），剂量为 5 mg/kg 体重，每日皮下注射。对于结肠癌模型，我们将 2.5×106 HCT-116 过表达 Bcl2 的结肠癌细胞皮下注射到雌性裸鼠的右侧。我们通过腹膜内注射给小鼠 5 mg/kg 体重的 b-AP15。对于肺癌模型，我们将 2×105 LLC 细胞皮下注射到雌性 C57/B6 小鼠的右后侧。当肿瘤长到约 50 mm3 大小时（定义为第 0 天），我们随机将小鼠分为两组，一组接受载体（n=4）或 b-AP15（n=4），剂量为腹膜内注射 5 mg/kg 体重，治疗周期为 2 天治疗，然后休息 2 天（2 天治疗，2 天停药），持续 2 周。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：细胞活力可通过荧光微培养细胞毒性试验或 MTT 试验来监测。对于 MTT 试验，将细胞接种到 96 孔平底板中过夜，然后暴露于药物中，使用 DMSO 作为对照。在孵育结束时，将 10 µl 5 mg/mL MTT 原液加入到每个孔中，并将板在 37°C 下孵育 4 小时。用 100 µL 10% SDS/10 mM HCl 溶液在 37°C 下过夜溶解甲臜晶体。使用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 平板读数器在 590 nm 处测量吸光度[2]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：对于去泛素化酶抑制试验，将 19S 调节颗粒 (5 nM)、26S (5 nM) UCH-L1 (5 nM)、UCH-L3 (0.3 nM)、USP2CD (5 nM) USP7CD (5 nM) USP8CD (5 nM) 或 BAP1 (5 nM) 与 DMSO 或 b-AP15 一起孵育，并使用配备 380 nm 激发和 460 nm 发射滤光片的 Wallac VICTOR 多标记计数器或 Tecan Infinite M1000 监测泛素-AMC (1,000 nM) 的裂解[1]。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：UCHL5/Usp14[1]

参考文献：

[1]. D'Arcy P, et al. Inhibition of proteasome deubiquitinating activity as a new cancer therapy. Nat Med. 2011 Nov 6;17(12):1636-40. [2]. Wang X, et al. The 19S Deubiquitinase Inhibitor b-AP15 is Enriched in Cells and Elicits Rapid Commitment to Cell Death. Mol Pharmacol. 2014 Jun;85(6):932-45. [3]. Tian Z, et al. A novel small molecule inhibitor of deubiquitylating enzyme USP14 and UCHL5 induces apoptosis in multiple myeloma and overcomes bortezomib resistance. Blood. 2014 Jan 30;123(5):706-16.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球最新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。