循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells, CTCs）是来源于实体瘤并进入外周血循环中的稀有细胞。
由于CTC在血液中的数量通常较低，而外周血中存在大量白细胞和红细胞，因此如何从复杂血液环境中富集并分析CTC，一直是液体活检研究中的重要挑战。在进行免疫荧光检测、流式分析、PCR检测、单细胞测序、转录组分析等研究时，大量白细胞来源的细胞信号和核酸背景可能影响目标细胞分析。因此，在检测前降低CD45⁺白细胞比例，有助于提高样本中目标细胞的相对比例，为后续分析提供更合适的样本基础。
CentriSep™人CD45⁺细胞去除试剂盒采用负向富集（Negative Enrichment）策略。
其核心思路不是直接捕获CTC，而是在人血样品密度梯度离心过程中，特异性的将CD45+细胞随红细胞一起快速沉降到离心管底部，未被标记的细胞留在分离液上层，从而富集剩余CD45⁻细胞群体。
产品信息：
| 货号 | 120-7004 |
| 保存条件 | 2-8℃，不可冷冻 |
| 有效期 | 一年 |
| 规格 | 小包装（2mL，可处理40mL全血）；大包装（5×2mL，可处理200mL全血） |
操作流程概览：
1. 全血样本中加入CD45去除试剂（每1mL全血加50μL），混匀；
2. 室温孵育20-30分钟；
3. 加入等体积细胞分选缓冲液稀释样本；
4. 将稀释后血样轻轻加至淋巴细胞分离液上层；
5. 1200×g离心20分钟（减速设置为0）；
6. 收集分离液界面层上方的细胞；
7. 清洗后获得富集细胞群体。
CentriSep™人CD45⁺细胞去除试剂盒的去除效果经由流式细胞术验证。
验证数据：
| 检测项目 | 未去除处理 | 经CentriSep™去除处理 |
| CD45⁺细胞比例 | 85.73% | 0.92% |
| CD45⁺细胞去除率 | — | 约98.9% |
数据解读：
验证使用人白膜血样本，未处理组中CD45⁺白细胞占细胞总数的85.73%。经CentriSep™处理后，CD45⁺细胞比例降至0.92%，去除率约为98.9%。
这意味着处理后样本中绝大部分白细胞已被去除，CD45⁻目标细胞（包括CTC）的比例得到显著提升，为下游检测提供了更低背景的细胞样本。
目前CTC富集方法主要包括阳性富集（Positive Selection）和阴性富集（Negative Selection）两种策略。
阳性富集通常利用EpCAM等肿瘤相关标志物直接捕获CTC。但需要注意不同肿瘤类型以及不同转移阶段的CTC具有较强异质性，部分CTC可能出现上皮标志物表达变化，从而影响依赖单一标志物的捕获效率。而负向富集策略则通过去除血液中的正常细胞，减少对CTC表型的依赖。
CentriSep™采用CD45⁺白细胞去除方式，优势包括：
不依赖单一CTC标志物：无需通过EpCAM等单一表面标志物识别目标细胞，有助于保留不同表型的CD45⁻候选细胞群体。
保持细胞未标记状态：CTC未经过磁珠或捕获抗体结合，可用于后续免疫染色、分子检测、细胞分析。
操作设备要求低：无需磁力架、分选柱或专用分选设备，常规离心设备即可完成主要操作流程。
在CTC相关研究中，研究人员可能需要进一步分析基因突变、基因表达、肿瘤相关分子特征。通过降低CD45⁺白细胞比例，可以减少血液背景细胞带来的干扰，提高后续检测样本质量。
单细胞测序需要高质量的细胞输入。大量白细胞污染可能导致非目标细胞比例增加、测序数据利用率降低、下游细胞注释复杂化。通过前处理降低CD45⁺细胞比例，有助于获得更加适合单细胞分析的富集样本。
CTC具有明显异质性，不同细胞可能表现出不同表型。采用不依赖单一肿瘤标志物的负向富集方式，有助于减少因标志物表达差异造成的研究偏差。
由于CTC未经过特异性捕获标记，可结合后续实验开展免疫荧光分析、细胞表型检测、分子水平研究。
| 特点 | 优势 |
| CD45⁺白细胞去除 | 降低血液背景，富集目标细胞 |
| 负向富集策略 | 减少对单一CTC标志物依赖 |
| 全血直接处理 | 减少样本预处理步骤 |
| 无需磁力设备 | 降低实验设备要求，节省成本 |
| 细胞无需额外标记 | 适合多种下游分析，保持细胞天然状态 |
| 操作简便 | 仅需常规离心机，约40分钟完成主要流程 |
不是。CentriSep™获得的是经过CD45⁺细胞去除后的富集细胞群体。由于CD45主要用于标记血液来源白细胞，去除CD45⁺细胞后，剩余细胞中CD45⁻目标细胞比例会提高，但其中可能包含其他非白细胞来源细胞。如需进一步确认CTC身份，可结合肿瘤相关标志物染色、形态学分析或分子检测进行鉴定。
EpCAM阳性富集是一种常见CTC研究策略，但部分CTC可能由于表型变化导致EpCAM表达降低。肿瘤细胞在转移和进展过程中会发生上皮-间质转化，导致EpCAM等上皮标志物表达显著下调甚至丢失。CD45⁺细胞去除属于负向富集策略，不直接依赖CTC表面某一种标志物，因此适用于需要研究CTC异质性的实验场景。
可以。获得的富集细胞群体可根据实验需求进行DNA提取、RNA提取、PCR分析或测序分析。由于CTC全程未经磁珠或抗体标记，细胞裂解后释放的核酸可直接用于下游分子检测。
不需要。CentriSep™通过密度梯度离心完成细胞分离，仅需常规离心设备，无需磁力架、分选柱或任何专用分选仪器。
本产品针对人全血样本进行优化。根据产品说明，也可应用于其他形式的血液样本（如白膜血、脐带血），但用量需根据具体试验条件调整。对于特别浓稠的样品，建议在加入试剂前用PBS稀释。
CentriSep™定位为科研用途（RUO），用于生命科学研究中的细胞分离和样本前处理，不用于疾病诊断或临床治疗。
储存条件为2-8℃冷藏，务必避免冷冻，有效期为12个月。冷冻会破坏密度梯度介质性能，影响分离效果。
CentriSep™人CD45⁺细胞去除试剂盒通过降低全血样本中的CD45⁺白细胞背景，为CTC相关研究提供一种简便的负向富集方案。无需磁力设备，仅需常规离心操作，即可帮助研究人员获得更适合后续细胞分析和分子检测的富集样本。
经流式验证，CD45⁺细胞比例可从85.73%降至0.92%，去除率约98.9%，显著降低血液背景干扰。
适用于CTC富集研究、液体活检相关实验、肿瘤异质性研究、单细胞分析前处理等多个科研场景。
产品货号：120-7004｜广州信天翁生物科技有限公司
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