蛋白胶银染服务
银染的原理是银离子在碱性pH 环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上而显色。由于银染的灵敏度很高,可染出胶上低于1 ng/蛋白质点,故广泛的用在2D 凝胶分析上,及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。这里介绍的是我们公司成功运用的银染方法,对关键操作及要求做了补充
蛋白质糖基化位点及糖型鉴定
蛋白质糖基化位点鉴定最常用的是多级质谱法,蛋白质经Trypsin酶切消化成肽段后,再用PNGase F进行糖链的酶切,得到肽段和糖链两个部分。对于肽段,通过高分辨一级质谱可发现与肽段分子量理论值比较存在0.986Da的质量漂移,则可确定发生了糖基化,二级质谱同时可测定中性
蛋白质定性分析
bottom-up分析策略:存在于溶液或者凝胶电泳条带中的蛋白质经过蛋白酶(如胰蛋白酶)酶解消化成较小肽段片段,再进入质量分析器,最后通过肽指纹图谱或者串联质谱法进行肽段鉴定。